|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Genetska podloga razvitka tumora hipofize |
| Voditelj: |
Branka Vizner |
| Ustanova: |
Institut "Ruđer Bošković", Zagreb |
| Sažetak: |
Uz već poznato, razlog nastanka adenoma hipofize (AH) mogu biti i mutacije onkogena i/ili tumor supresorskih gena, uvjetovane genetičkim ili epigenetičkim (imprinting) događajima. AH karakterizira promijenjena regulacija staničnog ciklusa koja je dosada zabilježena samo kao promjena ekspresije proteina-regulatora staničnog ciklusa. Genetske promjene odgovorne za ovu deregulaciju nepoznate su. Stoga je jedna od ideja predloženog projekta ispitati postojanje i uzročnu vezu mutacija gena i razvitka AH. Analizirat će se geni: a) koji kodiraju za proteine obitelji ciklina, inhibitora ciklin ovisnih kinaza te negativne regulatore staničnog ciklusa (GADD45 gama); b) potencijalni onkogeni AH (pttg), c) potencijalni tumor supresorski geni (PRKAR1A), u svim tipovima dostupnih AH čovjeka. Otkrivanje pojedinačnih mutacija provodit će se metodama SSCP, RFLP i sekvencioniranjem. U tumorima s mutacijom ispitat ćemo funkcionalnu aktivnost plejade gena, DNA čip metodom, sa svrhom otkrivanja utjecaja mutacije na funkciju «kaskadno» aktivnih gena i signalne puteve za koje još ne znamo utječu li na zloćudnu preobrazbu stanica adenohipofize. Nadalje, za kasnije su procese višestepenog promoviranja rasta vrlo vjerojatno odgovorni i brojni čimbenici rasta. Njihova je uloga, posebice obitelji inzulinu sličnih čimbenika rasta-IGF, u razvitku AH slabo istražena. Kako je djelovanje svih članova ove obitelji međuovisno, jasno je da promjena bilo kojeg dijela signalnog puta IGF djeluje na homeostazu stanica, što kao posljedicu može imati i pokretanje zloćudne preobrazbe stanice. Stoga je jedna od svrha predloženih istraživanja povezati status nađenih mutacija/promijenjene ekspresije gena (uključujući i gene za hormone specifične za pojedinu vrstu tumora) s deregulacijom aktivnosti proteina IGF. Aktivnost gena IGF pratit će se na razini ekspresije mRNA (RT-PCR) i specifičnog proteina, tj. njihovog utjecaja na proliferaciju stanica (Ki 67), apoptozu i aktivnost telomeraze. Epigenetsku promjenu gena za IGF R1 određivat ćemo statusom imprintinga. Molekularne mehanizme kojima proteini IGF djeluju na razvitak AH provjerit ćemo in vitro pokusima na somatotropinomu i somatomamotropnom tumoru štakora.
Originalan doprinos realizacije ovog projekta je rasvijetliti prirodu poremećaja (mutacije, promijenjena ekspresija gena, uloga proteina obitelji IGF, promjena unutarstaničnog signalnog puta) odgovornih za nenormalnu proliferaciju stanica AH čovjeka. |
|
|
|
|
|
|
|
