|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Eksperimentalni embrionalni tumori i razvoj zametaka sisavaca in vitro i in vivo |
| Voditelj: |
Florijana Jakuš |
| Ustanova: |
Medicinski fakultet, Zagreb |
| Sažetak: |
Reprodukcijsko zdravlje i normalni razvoj zametka predstavlja temelj zdravlja čovjeka i njegove vrste.U zadnje vrijeme velika se pažnja posvećuje istraživanju epigenetskih promjena pod utjecajem različitih teratogenih faktora za koje se čak pretpostavlja da bi se mogle vertikalno prenositi na potomstvo makar po definiciji ne predstavljaju mutacije nego reguliraju gensku ekspresiju. U projektu nastavljamo dugogodišnje istraživanje faktora koji utječu na razvojne procese rasta, diferencijacije te placentaciju sisavaca sada s posebnim naglaskom na regulaciju genske ekspresije putem metilacije DNA.
Istraživat će se utjecaj teratogena i DNA-demetilirajućeg sredstva 5-azacitidina na embrionalni teratokarcinom koji nastaje kao rezultat transplantacije zametaka glodavaca na ektopično mjesto, te primjenom ove supstancije in vivo u različitim fazama prenatalnog i postnatalnog razvoja. Pokušat će se ustanoviti da li se promjene nastale kod tretiranih životinja prenose na potomstvo. Istražit će se također djelovanje acetilsalicilne kiseline na razvoj teratokarcinoma za koju smo pokazali da smanjuje teratogeni efekt 5-azacitidina. Istraživat će se efekt 5-azacitidina, hipertermije i hipotermije na preimplantacijski razvoj in vitro. U originalnom modelu razvoja postimplantacijskih zametaka glodavaca in vitro istraživat će se utjecaj hipertermije i hipotermije te 5-azacitidina, faktora rasta i diferencijacije (RA, FGF, NGF, LIF, transferin) na razvoj zametaka u kritičnoj fazi gastrulacije.
Metilacijske promjene nastale prvenstveno pod utjecajem 5-azacitidina pratiti će se na razini DNA i RNA. Pomoću globalnog profila ekspresije RNA (microarray) pratit će se ekspresija u testisima i preimplantacijskim zamecima in vitro. U svim modelima provest će se analiza svjetlosnom i elektronskom mikroskopijom. Imunohistokemijski i western analizom će se dokazivati ekspresija proteina karakterističnih za diferencirane i nediferencirane stanice te proteina koji reguliraju: proliferaciju stanica, supresiju tumora, proteina toplinskog šoka, apoptozu. Morfometrijskom analizom kvantificirat će se ekspresija u pojedinim tkivima. Statistički će se evaluirati svi rezultati.
Predloženim istraživanjem povećat će se razumijevanje molekularnih mehanizama rasta i diferencijacije u sisavaca što je od bitne važnosti za očuvanje reprodukcijskog zdravlja čovjeka kao i u otkrivanju mehanizama razvoja tumora. |
|
|
|
|
|
|
|
