|
|
|
|
|
|
Detalji |
Projekt: |
Nove metode u dijagnostici akutnih nebakterijskih upala SŽS-a u djece |
Voditelj: |
Goran Tešović |
Ustanova: |
Medicinski fakultet, Zagreb |
Sažetak: |
Nebakterijske upale najčešće su akutne infekcijske bolesti SŽS-a u djece. Iako je etiološka dijagnostika, naročito u posljednjem desetljeću, značajno napredovala, analiza celularnih elemenata temelji se uglavnom na klasičnoj citološkoj analizi sedimenta likvora. Postoji tek nekoliko objavljenih radova u kojima se prikazuju rezultati imunofenotipizacije stanica CSL-a u upalnim bolestima SŽS-a u djece. Predloženo istraživanje, prema našim saznanjima, jedinstveno je takovo istraživanje u svijetu, a osobit mu je značaj inzistiranje na uključivanju bolesnika dječje dobi s precizno utvrđenom etiologijom upalne bolesti SŽS-a. U istraživanje će biti uključeno oko 120 bolesnika dječje dobi s nebakterijskim upalama SŽS-a u kojih će se dokaz etiologije bazirati na: (1) izolaciji virusa iz CSL-a ili (2) dokazu virusnog antigena iz CSL-a metodom lančane reakcije polimerazom (eng. polymerase chain reaction, PCR), ili (3) izolaciji virusa iz drugih bioloških materijala (urin, obrisak ždrijela, stolica) uz prisutnu serokonverziju, odnosno signifikantni porast titra specifičnih protutijela na izolirani patogen dokazan testom neutralizacije, ili (4) serološkom dokazu (ELISA i WB) za bolesnike s neuroboreliozom. U svih ispitanika učinit će se imunofenotipizacija limfocita i monocita CSL-a metodom protočne citometrije, a odredit će se i kemokinski receptori i njihovi ligandi u CSL-u i perifernoj krvi te učiniti dodatne pretrage seruma ispitanika. Uzorci CSL-a za imunofenotipizaciju limfocita i monocita analizirat će se unutar 30 minuta od učinjene lumbalne punkcije, a uzorci za analizu kemokinskih receptora i pretrage seruma pohranjivat će se u ledenicu pri temperturi od - 80°C. Za imunofenotipizaciju koristit će se metoda trostrukog bojanja, primjenom panela monoklonskih protutijela specifičnih za molekule CD3, CD4, CD45RA, CD45RO, CD62L i CD14. Određivat će se kemokinski receptori CXCR3 i CCR5 te njihovi ligandi CXCL9, CXCL10 i CXCL11, kao i koncentracije drugih proupalnih citokina. Planiraju se učiniti i dodatne pretage seruma ispitanika: prokalcitonin, amiloid A i CRP. Dobijeni rezultati mogli bi i rasvijetliti osobitosti lokalne celularne imunoreakcije u tih bolesnika. Rezultati će se iskoristiti i za kreiranje dijagnostičkog algoritma za brzo razvrstavanje bolesnika s upalnim nebakterijskim bolestima SŽS-a. Svrha spomenutog algoritma je racionalizacija etiološke dijagnostike u bolesnika dječje dobi s upalnim bolestima SŽS-a. |
|
|
|
|
|
|