|
|
|
|
|
|
Detalji |
Projekt: |
Nerazdvajanja kromosoma embrija u partnera s neplodnošću |
Voditelj: |
Anđelka Radojčić-Badovinac |
Ustanova: |
Medicinski fakultet, Rijeka |
Sažetak: |
Ovo istraživanje se bavi važnim elementima neuspjeha implantacije embrija. Želimo ispitati da li CASA (Computer-Aided Sperm Analysis) parametari osim na oplodnju mogu ukazivati i na kvalitetu i razvoj embrija. Cilj ovog istraživanja je uspostaviti PGD (Preimplantacijska genetska dijagnoza) metodu i uz pomoć ove metode istražiti da li euploidija embrija ovisi o nalazu sjemena, CASA parametara, Y delecijama, kromosomopatijama roditelja, starosti majke ili niti jednom od ispitivanih čimbenika. Ispitanici su pacijenti sterilitetne ambulante, te Odjela za humanu reprodukciju. Muški pacijenti će se podijeliti u nekoliko grupa ispitanika. Prvu grupu čine pacijenti s normalnim spermiogramom koji nakon toga ne ulaze u daljnje postupke medicinski pomognute oplodnje; druga grupa su pacijenti urednog nalaza u postupku inseminacije (AIH); treća grupa pacijenti sa oligo i/ili asthenozoospermia u postupku AIH; četvrta grupa pacijenti urednog nalaza u postupaku umjetne oplodnje (IVF+ET); peta grupa su pacijenti s teškom oligoasthenozoospermijom koji ulaze u ICSI (IntraCytoplasmic Sperm Injection) proceduru. U drugi dio istraživanja biti će uključeni muškaraci s oligoastenozoospermijom. Istraživati će se CASA parametari i FISH (Florescent in situ hybridization) analiza probama za X, Y, 21,13, 18, 16 i 22 kromosome nativnog ejakulata, sedimenta i supernatanta pripremljenog uzorka. Kromosome spermija je bilo tehnički teško utvrditi, stoga će FISH metoda dati valjane spoznaje za najčešća nerazdvajanja kromosoma spermatogeneze. Osim toga, rezulteti će nam biti valjani pokazatelj u kojoj mjeri i koje aberacije kromosoma su češće u sedimentu od supernatanta ejakulata. Kriteriji za uključivanje pacijenata u program preimplantacijske genetske dijagnostike biti će 1) dob žene (38 i više godina), 2) 3 i više neuspjelih IVF postupka, 3) ponovljeni gubitak trudnoće, 4) promijenjeni kariotip detektiran u perifernoj krvi partnera i Y-kromosomske mikrodelecije muškog partnera. Citogenetska analiza limfocita raditi će se kratkotrajnom kulturom periferne krvi, te GTG bojanjem kromosoma. Analiza mikrodelecija Y kromosom ratiti će se PCR metodom i probama za AZFa (sY84, sY86), AZFb (sY127, aY134) i AZFc (sY254, sY255) regije kromosoma Y. Embrionalni kariotip analizirati će se po biopsiji FISH metodom i kromosomskim probama. Čimbenici rizika nerazdvajanja kromosoma, osim iskustveno starosti majke, nisu poznati. Želimo utvrditi da li istraživanje sjemena može biti dodatni čimbenik. |
|
|
|
|
|
|