|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Molekularna epizootiologija važnih bakterijskih zoonoza |
| Voditelj: |
Željko Cvetnić |
| Ustanova: |
Hrvatski veterinarski institut, Zagreb |
| Sažetak: |
Primjena molekularnih tehnika ima veliko značenje u epizootiološkim istraživanjima te njihova uloga u brzoj i sigurnoj dijagnostici postaje sve važnija. Molekularna epizootiologija omogućava prepoznavanje vrste, pojave i širenje bolesti između različitih vrsta životinja, ljudi i okoliša. Dobiveni izolati uzročnika važnih bakterijskih zoonoza: tuberkuloze, bruceloze, leptospiroze i Q-groznice bit će genotipizirani korištenjem različitih molekularnih metoda, a na temelju dobivenih rezultata međusobno uspoređivani. Različite vrste M. tuberculosis (MTBC) kompleksa dokazat ćemo uz pomoć IS6110, GenoType MTBC hibridizacijskog kita, a tipizaciju izolata izvršit ćemo VNTR-MIRU tipizacijom na osnovi broja kopija ponavljajućih jedinica na 12 nezavisnih lokusa unutar genoma. Korištenjem VTNR pristupa temeljenog na minisatelitima osigurat će se visoka rezolucija analiza u molekularnoj epidemiologiji vrsta MTBC, a zbog svoje stabilnosti i neovisnosti o broju kopija IS6110 u genomu metoda je posebno pogodna za epidemiološka istraživanja. Nadalje, GenoType CM i AS tehnikama identificirat će se druge različite druge vrste mikobakterija, a genotipizacija M. avium kompleksa (MAC) s RFLP tipizacijom na temelju razlika obzirom na insercijsku sekvencu IS1245. Dokaz pripadnosti rodu Brucella sp. temelji se na umnožavanju dijela gena koji kodira sintezu proteina BCSP-31. Pomoću specifičnih početnica dokazali bi unutar insercijske sekvence IS711 slijed nukleotida karakterističan za pojedine vrste brucela. PCR-RFLP metoda omp31 i omp2 lokusa koristit će se za diferencijaciju i identifikaciju pojedinih vrsta i biovarova Brucella sp. Prisutnost poznatih patogenih vrsta leptospira u uzorku dokazivat ćemo PCR-om s parom početnica (Adia214 i Adia215) specifičnih za segment gena koji kodira za protein asociran s hemolizom. Također PCR-om dokazivat ćemo i DNK C. burnetii u genitalnim brisevima, mlijeku, pobačenim fetusima, krpeljima i krvi ljudi te ćemo na brz i siguran način omogućiti identifikaciju kliconoša Q groznice, prvenstveno u malih preživača. Rezultati naših pretraga kontrolirat će se u referalnim laboratorijima. Ovim istraživanjem će se dobiti uvid u rasprostranjenost i genetske osobitosti uzročnika važnih bakterijskih zoonoza. Uspoređivanjem izdvojenih sojeva na molekularnoj razini utvrdit će se njihova genetska srodnost, dokazati izvori zaraze te način širenja, što će pomoći u sprječavanju širenja zoonoza na ljude i među životinjama te pravodobno suzbijanje bolesti . |
|
|
|
|
|
|
|
