|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Posttranskripcijsko utišavanje stresnih proteina pomoću siRNA nanoterapije |
| Voditelj: |
Karmela Barišić |
| Ustanova: |
Farmaceutsko-biokemijski fakultet, Zagreb |
| Sažetak: |
Stresni proteini (Hsp) se induciraju u stresnim stanjima prilikom promjena u okolišu stanice te u fiziološkim stanjima prilikom staničnog ciklusa, aktivacije čimbenika rasta, razvoja i diferencijacije. U fiziološkim uvjetima pojedini stresni proteini djeluju kao šaperoni ili kao proteaze obavljajući važne unutarstanične funkcije. U stanjima stresa dolazi do poremećaja u strukturiranju proteina, a šaperoni pomažu njihovom ponovnom strukturiranju ili razgradnji ukoliko ponovno strukturiranje nije moguće. Hsp27 i Hsp70 inhibitori su ključnih čimbenka apoptoze. Ti stresni proteini inhibiraju nastanak apoptosoma, a Hsp70 uz to inhibira čimbenik indukcije apoptoze. Hsp90 također inhibira apoptozu, ali i stabilizira niza kinaza ključnih u malignoj transformaciji stanice (ErbB2, Src, Abl, Raf, Akt i dr.). Sposobnost stresnih proteina da zaustave proces programirane stanične smrti predstavlja bitan aspekt njihove povezanosti s malignom proliferacijom.
Cilj i svrha ovog istraživanja je utišati stresne proteine kako bi se in vitro inducirala apoptoza malignih stanica. U tu svrhu koristila bi se nova moćna tehnologija koja počiva na RNA interferenciji (RNAi), specifičnoj razgradnji ciljne mRNA pomoću duge dsRNA ili kratke siRNA. Za terapijsku primjenu siRNA in vivo potrebno je razviti novi sustav ciljane isporuke lijeka (siRNA) na mjesto djelovanja. siRNA nanoterapija, tj. uporaba liposoma, kitozanskih nanosfera ili nekovalentnih kompleksa veličina 10-100 nm koje uklapaju siRNA, mogla bi učinkovito i selektivno isporučiti siRNA u maligne stanice. Ta se tvrdnja može obrazložiti činjenicom što nanočestice djeluju na istoj nanorazini na kojoj počivaju biološki procesi pa su se pokazale idealnim za selektivnu i učinkovitu isporuku aktivnih tvari u stanicu. Standardnim metodama analizirati će se konstitutivna i inducirana apoptoza u tumorskim stanicama prije i nakon transfekcije sa siRNA, "golom" i uklopljenom u nanosfere, za specifično utišavanje Hsp27, Hsp70 i Hsp90. Na takav bi se način procijenio utjecaj utišavanja svakog stresnog proteina na apoptozu u tumorskim stanicama i učinkovitost siRNA nanoterapijskoga sustava in vitro. Ovo je istraživanje u skladu s konceptom razvoja novih agenasa koji bi djelovali učinkovito i selektivno na fundamentalnim kontrolnim biološkim razinama kao što je razina genske ekspresije. |
|
|
|
|
|
|
|
