|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Mehanizmi narušavanja strukture lipoproteina djelovanjem vanjskih čimbenika |
| Voditelj: |
Dubravka Krilov |
| Ustanova: |
Medicinski fakultet, Zagreb |
| Sažetak: |
Lipoproteini iz krvne plazme su prijenosnici lipida netopivih u vodi kroz krvni sustav. Poremećaj metabolizma lipoproteina može uzrokovati aterogenezu. Klinička ispitivanja su ukazala na vanjske čimbenike koji potiču aterogenezu. Molekularni mehanizmi djelovanja lipoproteina u nastanku i razvoju ateroskleroze još uvijek nisu dovoljno razjašnjeni. Osnovna prepreka u istraživanjima je što su pojedini razredi lipoproteina smjese čestica različite veličine, kemijskog sadržaja i površinske raspodjele lipidne i proteinske faze, pa se uvijek mjere usrednjeni efekti. Zato se ovim projektom predlaže istraživanje dobro definiranih uzoraka homogenih čestica iz odabranih podvrsta lipoproteina male gustoće (LDL) i lipoproteina velike gustoće (HDL). Proučavat će se strukturne promjene izazvane djelovanjem vanjskih čimbenika (kisik, metali, vitamini, apolipoproteini, nikotin, alkohol) na sLDL, HDL2 i HDL3 čestice. Cilj je promatrati promjene i usporediti djelovanje jednakih čimbenika na odabrane lipoproteine, te postaviti modele molekularnih mehanizama njihovih djelovanja. Osnovni strukturni parametri lipoproteina u komponentama odredit će se infracrvenom (FTIR) i Raman spektroskopijom. Paralelno će se razvijati metoda pojačavanja signala kod malih koncentracija uzorka uporabom poroznog silicija kao podloge za SERS. Detaljno će se analizirati karakteristične spektralne vrpce lipidnih i proteinskih dijelova čestice. Mjerenjem spektara razdvojenih frakcija omogućit će se dobivanje potrebnih informacija za analizu kompleksnih spektara cijele čestice. Očekuje se da će ovakva karakterizacija strukture, na podlozi koja poboljšava razlučivanje, pokazati kakve strukturne promjene uzrokuju vanjski čimbenici. Kako uzrokovane strukturne promjene djeluju na dinamiku oksidacije lipoproteina pratit će se metodom elektronske paramagnetske rezonancije (EPR), mjerenjem vremenske promjene oksidacijskih pokazatelja. Promjene u interakciji lipida i proteina na površini čestice istraživat će se metodom fluorescentne spektroskopije dvostrukim obilježavanjem i lipida i proteina, te mjerenjem prijenosa energije, FRET. Opetovanim nizovima mjerenja na uzorcima dobivenim od različitih davalaca, provjeravat će se pouzdanost odabranih metoda i adekvatnost molekularnih modela za karakterizaciju čestica lipoproteina. Predložena istraživanja su bazična a rezultati pomažu u objašnjenju povezanosti promjena strukture na molekularnoj razini i djelovanja modificiranih lipoproteinskih čestica u aterogenezi. |
|
|
|
|
|
|
|
