|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Regulacija Na/H izmjenjivača izooblika 3 (NHE3) posredovana CaM kinazom II |
| Voditelj: |
Mirza Žižak |
| Ustanova: |
Medicinski fakultet, Zagreb |
| Sažetak: |
Predloženim istraživanjima nastoje se razjasniti molekularni mehanizmi koji stoje iza Ca2+/CaM ovisne kinaze II (CaMKII) posredovane regulacije Na+/H+ izmjenjivača isooblika 3 (NHE3). Naša prethodna istraživanja unijela su nove spoznaje u mehanizam regulacije NHE3 prikazujući NHE3 kao novog člana CaMKII veznih proteina i determinirajući sudjelovanje regulacijskog čimbenika NHERF2 u signalnom kompleksu koji posreduje CaMKII inhibiciju NHE3. Zbog sličnosti između CaMKII vezne domene u NHE3 i tzv. „autoinhibitory domain-like“ domene CaMKII veznih proteina NHE3 se može svrstati u dotičnu skupinu. Ovo je podržano našim prethodnim istraživanjima u kojima je pokazano da NHE3 dijeli neka funkcionalna svojstva s ostalim članovima ove grupe. CaMKII veže NHE3 u Ca2+ bazalnim uvjetima iz čega proizlazi da je CaMKII vezana konstitutivno te da ju NHE3 drži stalno aktivnom. Stoga će se u svrhu provjere predloženog modela odrediti postoje li sličnosti u vezanju te koje su aminokiseline unutar NHE3 važne za vezanje CaMKII. S druge strane, budući da su „autoinhibitory domain-like“ domene sposobne regulirati aktivnost CaMKII, najvjerojatnije kroz interakciju s njenom katalitičkom domenom odredit će se da li domena u NHE3 posjeduje ista funkcionalna svojstva.
Pošto je za NHERF2 pokazano da je neophodan u CaMKII inhibicije NHE3 predložena su istraživanja u svrhu razumijevanja načina na koji NHERF2 provodi ovu funkciju. K tome, prethodna su istraživanja snažno sugerirala da bi fosforilacija mogla biti uključena u regulaciju na način da regulira intenzitet fosforiliranja potencijalnih CaMKII fosforilacijskih konsenzus mjesta. Određivanje uloge NHERF2 u fosforilaciji NHE3 unijet će nove spoznaje koje bi mogle pomoći u razumjevanju ulogi regulacijskih proteina uključenih u CaMKII regulaciji ciljnih proteina.
Stoga, svrha je ovog prijedloga proširiti prethodna istraživanja u razjašnjavanju nekoliko molekularnih mehanizama koji stoje iza CaMKII regulacije NHE3 aktivnosti: 1) da li je fosforilacija mehanizam uključen u regulaciju NHE3; 2) koja je uloga NHERF2 u CaMKII regulaciji NHE3. i 3) da li CaMKII vezna domena unutar NHE3 C-kraja djeluje poput drugih CaMKII veznih proteina čija vezna domena sliči autoinhibicijskoj domeni u CaMKII. |
|
|
|
|
|
|
|
