|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Patobiokemija glikosfingolipidnih antigena |
| Voditelj: |
Anita Markotić |
| Ustanova: |
Medicinski fakultet, Split |
| Sažetak: |
Glikosfingolipidi (GSL) su uključeni u procese staničnog prepoznavanja te pokazuju modulacijski učinak na različite membranske proteine. GSL se u pravilu nalaze u vanjskom jednosloju plazma membrane, međutim vrlo niske koncentracije gangliozida su pronađene u endoplazmatskom retikulumu, Golgiju i lizosomima. Izražaj GSL posredovan je različitim citokinima.
Cilj predloženog projekta je definirati GSL-antigene (kako neutralne tako i kisele GSL, gangliozide) pri različitim fiziološkim i patofiziološkim uvjetima: 1. regeneraciji štakorske jetre; 2. neuroloških poremećaja kod djece; 3. dijabetesa tipa 1 kod djece; i 4. vježbanja miševa s delecijom gena za beta2-mikroglobulin (B2M). Naše hipoteze su: 1. gangliozid GM3 je smješten pretežno u citosolu tijekom regeneracije jetre; 2. izražaj GSL u likvoru djece s neurološkim poremećajem se razlikuje u odnosu na zdravu djecu; 3. djeca oboljela od dijabetesa tipa 1 specifično izražavaju različita protutijela na GSL u serumu u odnosu na zdravu djecu; 4. molekule glavnog kompleksa tkivne podudarnosti skupine I (major histocompatibility complex class I, MHC skupine I, kojih je B2M sastavni dio) posreduju stjecanje određenog GSL-fenotipa različitih populacija leukocita (neutrofila, monocita i T limfocita) nakon vježbanja.
Očekivani rezultati su: 1. raspodjela GSL-antigena unutar stanice tijekom regeneracije jetre; 2. izražaj GSL u likvoru djece s neurološkim poremećajem; 3. protutijela na GSL kod dijabetesa tipa 1; i 4. GSL-antigeni na neutrofilima, monocitima te CD4+ i CD8+ T limfocitima.
Metode istraživanja će biti: 1. imunohistokemija uz konfokalni mikroskop; 2. i 3. tankoslojna kromatografija visokog razlučivanja (high perfomance thin layer chromatography, HPTLC) u kombinaciji s imunobojenjem, i 4. protočna citometrija. Rezultati određivanja imunohistokemijskim metodama, pomoću HPTLC i protočnom citometrijom će biti prikazani fotografijama koje će biti praćene stupnjevitom procjenom (vizualna procjena i ispis s uređaja “Agilent 2100 Bioanalyzer”).
Značenje predloženog istraživanja je u tome što će se visoko sofisticiranim biokemijskim metodama dobiti uvid u metabolizam GSL tijekom pojedinih fizioloških i patofizioloških stanja. Rezultati će ukazati na moguću ulogu GSL u razvijanju određenog stanja ili bolesti na osnovu čega će se moći predložiti farmakološke terapeutske supstancije. Osim toga bi se predložene metode određivanja GSL koje dosad nisu opisane u literaturi mogle primjeniti dijagnostički |
|
|
|
|
|
|
|
