|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Humana reprodukcija-biološki i biofizički čimbenici funkcije membrane spermija |
| Voditelj: |
Mirjana Gavella |
| Ustanova: |
Klinika za dijabetes, endokrinologiju i bolesti metabolizma "Vuk Vrhovec" |
| Sažetak: |
Identifikacija mehanizama odgovornih za narušenu funkciju humanih spermija neophodna je za razumijevanje uzroka smanjenog oplodnog potencijala. Jedan od uzroka poremećene funkcije spermija leži u utjecaju oksidativnog stresa (OS). Da bi se moglo neutralizirati štetne učinke na funkciju spermija, potrebno je produbiti saznanja o biološkim i biofizičkim čimbenicima poremećene funkcije membrane spermija izloženih OS. U tom smislu smo u prethodnim radovima istražili i opisali utjecaj glikosfingolipida-gangliozida (Gn) na ublažavanje oksidacijskih procesa u spermijima. Utvrdili smo antioksidativnu aktivnost GD1b i GT1b u induciranoj lipidnoj peroksidaciji u membrani spermija. Dobiveni nalazi ukazuju na nekoliko mehanizama koji bi mogli biti uključeni u antioksidativna svojstva Gn kao što je “hvatanje” slobodnih radikala, heliranje Fe2+ iona i utjecaj na promjenu fluidnosti membrane. Ispitivanje bi trebalo nastaviti i proširiti na utvrđivanje mehanizama djelovanja ostalih Gn (GM1, GD1a, GT1a). Egzogeno dodani Gn, ovisno o njihovoj supramolekularnoj organizaciji, mogu djelovati u obliku micela ili kao monomeri. Stoga je za pretpostaviti da postoje razlike i u mehanizmima njihovog zaštitnog djelovanja na uređenost/fluidnost odnosno stabilizaciju membrane spermija izloženih induciranom stvaranju reaktivnih radikala. Modifikacije lipidne i proteinske komponente membrane pri OS utvrdile bi se primjenom biofizičkih pristupa u okviru spektroskopije elektronskom paramagnetskom rezonancijom (EPR). Promjene u fluidnosti membrane detektirale bi se analizom spektralnih parametara spinskih oznaka ugrađenih u staničnu membranu, a koje su analogne nativnim masnim kiselinama, no sadrže također i paramagnetsku reportersku grupu. Stvaranje slobodnih radikala pratilo bi se primjenom tzv. spinskih stupica koje omogućavaju specifičnu detekciju kratkoživućih radikala. Pored peroksidativnih oštećenja membrane, oksidacijski stimulus se može propagirati i na unutarstanični prostor te uzrokovati oštećenje DNK. Stoga bi se ispitivanje proširilo na utvrđivanje efekta Gn u zaštiti DNK od oksidacijskih oštećenja primjenom metode kometa, bazirane na mikrogel elektroforezi pojedinačnih stanica. Dobiveni rezultati imali bi za cilj ukazati na značajnost biokemijskih i biofizičkih promjena membrane spermija za biološku funkciju u zdravih i neplodnih muškaraca. Očekujemo da bi se time otvorile nove mogućnosti razvoja adekvatnih terapeutskih postupaka, usmjerenih na poboljšanje plodnosti. |
|
|
|
|
|
|
|
