|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Molekularne interakcije koštanog i imunološkog sustava |
| Voditelj: |
Ana Marušić |
| Ustanova: |
Medicinski fakultet, Zagreb |
| Sažetak: |
KLJUČNE POLAZIŠNE SPOZNAJE: Koštani i imunološki sustav međusobno su usko povezani, ali njihove stanične i molekularne interakcije nisu do kraja proučene a rezultati istraživanja staničnih i molekularnih posrednika tih interakcija često su proturječni. Naša dosadašnja istraživanja u okviru projekta Ministarstva znanosti i kolaboracijskog projekta zaklade Wellcome Trust, pokazala su da su molekule uključene u određivanje imunoloških reakcija važne u regulaciji koštanog metabolizma. CILJEVI I HIPOTEZE: Cilj je predloženog istraživanja istražiti djelovanje pojedinih imunoloških čimbenika na koštani metabolizam analizom koštanog fenotipa u miševa s nedostatkom ili suviškom određenog imunološkog čimbenika. Odabrali smo mišje modele poremećaja čimbenika koji bi, prema dosadašnjim spoznajama, mogli biti važni u održanju koštane homeostaze: miševi s izbačenim genima za Fas i ligand Fas, granzim A i B, LIGHT, ili CD26, te miševi koji pojačano izražavaju IL-7. OČEKIVANI REZULTATI: Na temelju prethodnih istraživanja, u miševa s izbačenim genima za Fas i ligand Fas očekujemo povećanu gustoću i stvaranje kosti, te pojačanu osteoblastogenezu. Pojačanu osteoblastogenezu očekujemo i u miševa bez granzimskog sustava. U miševa bez gena za LIGHT očekujemo blago smanjenu osteoklastogenezu. Nedostatak CD26 mogao bi smanjiti gubitak kosti izazvan upalom, a suvišak IL-7 mogao bi pojačati osteoklastogenezu i smanjiti koštanu masu. METODE PROVJERE REZULTATA: Koštani fenotip mutiranih miševa proučit će se histomorfometrijom koštanog tikva, analizom koštanih stanica te u modelima stvaranja i resorpcije kosti in vivo. Tijekom svih pokusa aktivnost koštanih stanica pratit će se histomorfometrijski na razini tkiva, staničnim kulturama in vitro, te određivanjem izražaja gena za citokine i molekule specifične za koštane stanice, i to protočnom citometrijom i kvantifikacijom genskog izražaja kvantitativnom polimeraznom lančanom reakcijom (qPCR). Rezultati svih istraživačkih postupaka u mutiranih miševa usporedit će se s kontrolnim miševima divljega tipa odgovarajuće dobi i spola. Specifičnost reakcije qPCR, obilježavanja protutijelima i drugih laboratorijskih postupaka provjerit će se pomoću odgovarajućih negativnih i pozitivnih kontrola. ZNAČENJE PREDLOŽENOG ISTRAŽIVANJA: Pokusi opisani u ovome istraživanju doprinijet će razumijevanju interakcije između kosti i imunološkog sustava i razvoju novih mogućnosti za liječenje koštanih poremećaja. |
|
|
|
|
|
|
|
