|
|
 |
|
|
|
|
|
|
| Detalji |
| Projekt: |
Primjena molekularnih analiza u proizvodnji goveđih zametaka in vitro |
| Voditelj: |
Zdenko Makek |
| Ustanova: |
Veterinarski fakultet, Zagreb |
| Sažetak: |
Proizvodnja goveđih zametaka in vitro obuhvaća složene postupke dozrijevanja, oplodnje i uzgoja in vitro. Kod in vitro oplođenih goveđih zametaka češće se javljaju abnormalnosti oplodnje kao što su polispermija, partenogeneza i asinkroni razvoj muškog i ženskog pronukleusa i usporen je proces kompaktacije i blastulacije, a češće se javljaju i kromosomske abnormalnosti. Osim toga, preživljavanje nakon dubokog smrzavanja i uspjeh transfera bitno je snižen kod in vitro uzgojenih zametaka u odnosu na zametke isprane iz maternice davateljica u postupku embriotransfera. Učinkovitost uzgojnih programa značajno bi se mogla poboljšati kada bi in vivo i in vitro dobivene zametke mogli odabrati s obzirom na spol zametka, određena ekonomska svojstva (mliječnost, prirast, plodnost) te otpornost na određene bolesti. U novije vrijeme razvijene su metode koje omogućuju analizu DNK zametnih stanica dobivenih biopsijom zametka. Najčešće korištena metoda je određivanje spola goveđih zametaka koja omogućuje učinkovitiju primjenu raspoloživih biotehnoloških metoda u uzgojnim programima proizvodnjom teladi željenog spola, što je od osobitog interesa za uzgoj kvalitetnih rasplodnih junica. Spol zametaka određuje se biopsijom nekoliko blasomera iz zametka u stadiju morule i blastociste te amplifikacijom DNK lančanom reakcijom polimerazom (PCR). Ovakva mikromanipulacija zametka dodatno smanjuje njegovu smrzljivost i preživljavanje nakon transfera, što rezultira puno nižom postotkom gravidnosti u odnosu na nebiopsirane zametke. Stoga je neophodno postići optimalne uvjete uzgoja in vitro s obzirom da kvaliteta zametka uvelike ovisi o mediju i uvjetima uzgoja poslije oplodnje. Kako je oksidacijsko oštećenje stanice zbog djelovanja slobodnih kisikovih radikala jedan od najštetnijih procesa u IVP zametku, cilj istraživanja je primjenom različitih antioksidansa i optimiziranjem uvjeta uzgoja zaštiti zametak od štetnog utjecaja slobodnih kisikovih radikala. Time će se poboljšati njihova razvojna sposobnost i kvaliteta, s obzirom da biopsija zametka u svrhu određivanja spola dodatno oštećuje zametak te se gubi njegova ekonomska vrijednost jer nije pogodan za transfer. Određivanje spola zametaka omogućuje učinkovitiju primjenu raspoloživih biotehnoloških metoda u uzgojnim programima proizvodnjom teladi željenog spola. Poboljšanje uvjeta uzgoja in vitro, determinacija spola zametaka te primjena protokola za duboko smrzavanje omogućiti će širu primjenu proizvodnje in vitro u stočarstvu. |
|
|
|
|
|
|
|
